Рефераты по медицине
Влияние перекисных условий на показатели функциональной активности нейтрофилов периферической крови человека

Скачать реферат [1,69 мб]   Информация о работе

Обозначения и сокращения

CD – кластер дифференцировки

FcR – Fc-рецептор

ICAM – intracellular cell adhesion molecule (молекула клеточной адгезии)

Ig – иммуноглобулин

LAMP1,2 – Lysosomal-associated membrane protein 1,2 — гликопротеин лизосомальной мембраны

NF-kB – нуклеарный фактор-kB

PАМР – патоген-ассоциированные молекулярные паттерны

TLR – Toll подобные рецепторы

АФК – активные формы кислорода

АТФ – аденозинтрифосфат

ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота

ИЛ – интерлейкин

ЛПС – липополисахарид

МСЛ – маннозо(маннан)связывающий лектин

НАДФ – никотинамидадениндинуклеотидфосфат

НСТ – нитросиний тетразолий

ПНЖК – полиненасыщенные жирные кислоты

ПОЛ – перекисное окисление липидов

РНК – рибонуклеиновая кислота

ФНО – фактор некроза опухолей

ФП – фагоцитарный показатель

ФЧ – фагоцитарное число

цАМФ – циклический аденозинмонофосфат

Введение

Представления о повреждающем действии свободнорадикальных или радикалообразующих продуктов одноэлектронного восстановления кислорода в биологических системах являются доминирующими в течение последних трех десятилетий. Основное внимание привлекают такие формы активированного кислорода, как супероксидный радикал, перекись водорода Н2О2, синглетный кислород О., гидроксильный радикал ОН., а также липидные радикалы, образующиеся в жидкой фазе при распаде гидроперекисей липидов ROOH. [1,2]

В многочисленных исследованиях было убедительно показано, что окислительные деструктивные процессы, вызываемые повышенными уровнями активированных форм кислорода в конденсированной водной фазе, а также липидными радикалами и гидроперекисями, могут лежать в основе клеточной патологии и сопряженных с нею заболеваний. В целом, результаты этих исследований можно рассматривать как развитие проблемы свободнорадикальной патологии и перекисного окисления в биологических структурах. [3] С этих позиций в настоящее время интерпретируются механизмы сердечно-сосудистой патологии и атеросклероза [4], дегенеративных заболеваний нервной системы [5], аутоиммунных и хронических воспалительных заболеваний [6], старения, злокачественного роста [7] и др.

Не менее важными, но значительно менее изученными, являются представления о биологической роли кислородных радикалов и процессов перекисного окисления в условиях физиологической нормы. Между тем, накапливается все больше фактов, указывающих на важную роль этих активных продуктов и процессов в нормальной жизнедеятельности.

Регуляторное участие активированных форм кислорода в жизнедеятельности клетки в норме установлено в процессах клеточного деления [8], экспрессии генов и апоптоза [9], a также в реакциях неферментативной регуляции окислительного стресса, обновлении состава и изменении функциональных свойств биомембран, участии в энергетических процессах, синтезе биологически активных веществ.

Основным механизмом образования эндогенной перекиси водорода в организме является реакция дисмутации, осуществляемая путем восстановления супероксиддисмутазами супероксидного анионрадикала. Источниками супероксидных анионрадикалов являются различные оксидазные системы, среди которых особое место занимает НАДФН‑оксидазная реакция, лежащая в основе «респираторного» взрыва, реализующегося в процессе фагоцитарной реакции. Генерация активных форм кислорода является одной из основных цитотоксических функций нейтрофилов. Известно, что недостаточная продукция перекиси водорода нейтрофилами в процессе фагоцитоза при хроническом гранулематозе влечет за собой нарушение противовоспалительных механизмов.[10]

По данным литературы перекись водорода эндогенного происхождения стимулирует накопление в клетке цAMФ и цГМФ, вызывает накопление ионов Са2+ в цитозоле и активацию основных протеинкиназ сигнальных путей и ингибирование протеинфосфатаз; что приводит к активации транскрипционного фактора NF-kB, а это, в свою очередь, вызывает секрецию провоспалительных цитокинов и индуцирует иммунный ответ, а также способствует синтезу и секреции белков острой фазы.

Очевидно, что роль эндогенной перекиси водорода в иммунной системе шире, чем предполагалось ранее и имеет значение не только для процессов фагоцитоза, но для запуска других иммунных процессов. [11, 12]. Известно, что активация нейтрофилов периферической крови происходит на фоне "праймированного" состояния. Праймирующий стимул вызывает метаболическую перестройку, не приводящую к активации клетки, следствием его влияния является усиление ответа на последующую активацию. Представление о механизме праймирования фагоцитарной реакции и респираторного взрыва нейтрофилов в настоящее время находится в стадии формирования. Предполагается, что праймирование реализуется в результате перекрестного взаимодействии сигнальных путей, задействованных в первичной сборке и активации NADPH оксидазы. [10, 11]

Ввиду сложности регуляции функций нейтрофилов возникает большой интерес к выяснению причин возникновения патологических процессов, связанных с дисфункцией процессов дегрануляции и усиленной генерации АФК полиморфноядерными гранулоцитами.

Изучение эффектов физиологических медиаторов на функционирование нейтрофилов, в частности, перекиси водорода эндогенного или экзогенного происхождения представляется актуальным для выработки в дальнейшем целенаправленного подхода к терапевтической коррекции нарушений их функциональной активности.

Целью данной работы было изучение влияния окислительных уловий на функциональную активность полиморфноядерных гранулоцитов периферической крови человека in vitro.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить влияние моделированных окислительных условий на динамику изменения поглотительной способности и фагоцитарной активности нейтрофилов на различных стадиях протекания фагоцитарной реакции.

2. Изучить влияние моделированных окислительных условий на кинетику ферментативных реакций внутриклеточного кислород-зависимого киллинга нейтрофилов в тестах спонтанного и индуцированного восстановления нитросинего тетразолия.

3. Изучить влияние моделированных окислительных условий на ферментативную активность миелопероксидазы нейтрофилов в тестах спонтанного и индуцированного окисления ортофенилендиамина.

4. Изучить влияние моделированных окислительных условий на способность нейтрофилов к спонтанной и индуцированной адгезии.

1. Обзор литературы

1.1 Молекулярные механизмы и физиологическая роль фагоцитарной реакции, осуществляемой нейтрофилами

Фагоцитоз – явление поглощения и переваривания нейтрофилами корпускулярного материала (бактерий, крупных вирусов, отмирающих собственных клеток организма или чужеродных клеток) (рисунок 1). Случайный или обусловленный рецепторами контакт микробной клетки с фагоцитом (макрофагом, нейтрофилом) приводит к образованию выростов мембраны – псевдоподий, окружающих чужеродную клетку. Сформировавшаяся вакуоль (фагосома) в 10-20 раз больше пиносомы. Она погружается в клетку, где после слияния с лизосомами образует фаголизосому. Именно в ней за счет активности гидролитических ферментов происходит полное или частичное разрушение патогена. Часть разрушенных компонентов микробной клетки удаляется в экстрацеллюлярную среду, другая остается на поверхности фагоцитирующей клетки.

Рисунок 1 – Механизм фагоцитарного процесса

Первая стадия – хемотаксис (рисунок 2). В качестве хемоаттрактантов выступают продукты, выделяемые микроорганизмами и активированными клетками в очаге воспаления (цитокины, лейкотриен В4, гистамин), а также продукты расщепления компонентов комплемента (С3а, С5а), протеолитические фрагменты факторов свертывания крови и фибринолиза (тромбин, фибрин), нейропептиды, фрагменты иммуноглобулинов и др. Однако, "профессиональными" хемотаксинами служат хемокины. Основным хемокином, управляющим миграцией нейтрофильных лейкоцитов, служит интерлейкин-8 (ИЛ-8). В очаге воспаления основными продуцентами ИЛ-8 являются макрофаги и клетки эндотелия. Сигналом для вывода циркулирующих лейкоцитов из кровеносного русла в ткань при воспалении является их взаимодействие с ИЛ-8, экспонированным на поверхности микроваскулярного эндотелия. Хемотаксис инициируется низкой концентрацией (10-8 - 10-10 М) веществ, в то время как их большие концентрации (10-6 10-7 М) вызывают прекращение хемотаксиса и активацию секреторных процессов, сопровождающуюся переходящим повышением в 10-50 раз содержания внутриклеточного Са2+.

Рисунок 2 – Хемотаксис нейтрофилов

Ранее других клеток в очаг воспаления мигрируют нейтрофилы, существенно позже поступают макрофаги. [15]

Адгезия обусловлена наличием на поверхности фагоцитов рецепторов для молекул, представленных на поверхности объекта (собственных или связавшихся с ним). При фагоцитозе бактерий или старых клеток организма хозяина происходит распознавание концевых углеводных групп - глюкозы, галактозы, фукозы, маннозы и др. Распознавание осуществляется лектиновыми рецепторами соответствующей специфичности, в первую очередь маннозосвязывающим белком и селектинами (рисунок 3).

Рисунок 3 – Пространственная организация лектиновых рецепторов

Специфическое распознавание подлежащего фагоцитозу объекта осуществляется при помощи рецепторов к опсонинам. Важная роль принадлежит Fc- рецепторам. Fc-рецепторы 1, 2А, 3А типов обеспечивают положительную регуляцию фагоцитоза. Fc- рецептор 2В типа обеспечивает негативную регуляцию фагоцитоза. Fc-рецептор 3В типа способен запускать Са- сигнальный путь и вызывать полимеризацию актина, но до конца его роль не изучена. Кроме этого активирующую функцию выполняют рецепторы к компонентам комплемента (CR1, 3, 4). [16]

Нейтрофил способен распознавать бактерии без предварительной их опсонизации, через TLR (Toll-Like Receptors) (рисунок 4).

Рисунок 4 – Пространственная организация Toll-like рецепторов

Интегрины нейтрофила Mac-1 (CD11b/CD18) и p150 (CD11c/CD18) также участвуют в прямом распознавании и связывании ряда микроорганизмов (рисунок 5).

Рисунок 5 – Рецепторы клеточной адгезии

Следующий этап – активация мембраны и образование фагосомы.

На этой стадии осуществляется подготовка объекта к погружению. Происходит активация протеинкиназы С, выход ионов кальция из внутриклеточных депо. Большое значение играют переходы золь-гель в системе клеточных коллоидов и актино-миозиновые перестройки. Вначале в месте контакта возникает участок плотного геля. Далее из-за увеличения концентрации Са2+ гель под влиянием гельзолина превращается в более жидкий золь. Это обуславливает «проваливание» объекта внутрь фагоцита.

Происходит обволакивание объекта вследствие изменения состояния цитоскелета и физико-химической структуры цитоплазмы. Низкомолекулярный G-актин превращается в полимеризованный F-актин в ходе последовательной активации ферментативного каскада. F-актин входит в состав цитофиламентов, которыми богата псевдоподия, формируемая фагоцитом при контакте с объектом. Псевдоподия вытягивается в направлении объекта и прилипает к нему. Вследствие сокращения актиновых волокон и изменения вязкости цитоплазмы объект полностью охватывается мембраной фагоцита, которая впоследствие замыканется по механизму «молнии». [18]

В цитозоле фагосомы сливаются с первичными лизосомами, образуя фаголизосомы. Первичные лизосомы, образованные аппаратом Гольджи, содержат ряд гидролаз, способных разрушать органические молекулы в кислой среде: протеиназы, фосфатазы, эстеразы, ДНК-азы, РНК-азы. Низкое значение рН внутри фагосом оказывает бактерицидное действие и создаёт оптимальную среду для активации лизосомальных гидролаз. В результате действия этих ферментов разрушаются полимерные молекулы и образуются аминокислоты, моносахариды, нуклеотиды, которые поступают в цитозоль и могут использоваться клеткой. Большая часть мембранных компонентов и непереваренные субстраты локализуются в остаточных тельцах, которые путём экзоцитоза возвращаются на поверхность плазматической мембраны фагоцитов, при этом значительная часть мембранных компонентов может утилизироваться и в самой мембране. [16]

Выделяют 2 основных механизма киллинга: кислородозависимый и кислородонезависимый. [10]

Кислородзависимый механизм. Важным компонентом является фермент НАДФH+-оксидаза. НАДФH+-оксидаза является частью биохимического пути, регулирующего поток электронов к различным субстратам. Фермент состоит из 5 белковых субъединиц, образующих комплекс НАДФH+-оксидазы и регуляторного белка Rac-2. В состав НАДФ-оксидазного комплекса входят: гликопротеины gp91 (91 кД, ген gp91phox) и p22 (22 кД, ген p22phox) — мембранные компоненты комплекса; цитоплазматические компоненты — белки p47 (47 кД, ген p47phox), p67 (67 кД, ген p67phox) и p40 (рисунок 6).

Сигнальные события на клеточной поверхности приводят к связыванию ГТФ с Rac-2 в цитоплазме. Rac-2 затем связывает и стабилизирует цитоплазматический белок p67, который фосфорилируется протеинкиназой C. Фосфорилирование p47 ведёт к его взаимодействию с цитоскелетом и транслокации в мембрану. [14]

В активированном нейтрофиле мембранные белки gp91phox и p22phox взаимодействуют с цитоплазматическими компонентами комплекса — 47 кД (p47phox) и 67 кД (p67phox). Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (G6PD) конвертирует глюкозо-6-фосфат в 6-фосфоглюконолактон, генерируя НАДФH и H+ из НАДФ+.

Рисунок 6 – Функционирование НАДФ оксидазного комплекса

Ферментный комплекс мембраны фагосом – NADPH-оксидаза восстанавливает О2, образуя супероксидный анион:

2 О2 + NADPH → 2 O2- + NADP+ + H+

Супероксидный анион спонтанно или при участии фермента супероксиддисмутазы превращается в пероксид водорода:

О2- + О2- + 2Н+ → Н2О2 + О2

Второй кислородзависимый механизм разрушения микроорганизмов осуществляется при участии миелопероксидазы, которая катализирует развитие токсического воздействия на различные микроорганизмы; перекиси водорода; супероксидного аниона; синглетного кислорода и гидроксильных радикалов, атомарного хлора (Сl). [39] Под действием миелопероксидазы, проникающей в фагосому при её слиянии с лизосомой, из пероксидов в присутствии галогенов (йодидов и хлоридов) образуются дополнительные токсичные окислители - гипойодид и гипохлорид.

Н2О2 + Cl- + H+ → НОС1 + H2O

В целом кислородзависимый механизм представлен на рисунке 7.

Рисунок 7 – Кислородзависимый механизм киллинга при фагоцитозе

Резкое увеличение потребления кислорода фагоцитирующей клеткой называется "респираторным взрывом". Активные формы кислорода инициируют свободнорадикальные реакции, разрушающие липиды клеточных мембран поглощённых фагоцитами бактерий. Некоторые устойчивые микроорганизмы остаются жизнеспособными внутри фагоцитов, и их антигены вызывают в месте скопления фагоцитов клеточный иммунный ответ и формирование гранулём. [14]

Бактерицидное действие в нейтрофилах оказывает и оксид азота (NO). Оксид азота в этих клетках образуется под действием фермента NO- синтазы из аргинина (рисунок 8). [17]

Супероксид-анион образует с NO соединения, обладающие большими бактерицидными свойствами, чем сам NO:

NO + О2- → ONOO- → ОН* + NO2

Пероксинитрил (ONOO-), оксид азота, диоксид азота, радикал гидроксила вызывают окислительное повреждение белков, нуклеиновых кислот и липидов бактериальных клеток. Оксид азота может непосредственно взаимодействовать с железосерными белками ЦПЭ, ингибируя дыхание и синтез АТФ в бактериях. При взаимодействии NO с О2 образуются нитриты, которые превращаются в нитраты, также обладающие токсическим действием.

Рисунок 8 – Работа NO- синтазы

Вспышка метаболической активности нейтрофила заканчивается его гибелью.

1.2 Активные формы кислорода: физиологические и биологические функции

В настоящее время известно, что в норме АМК (перекись водорода, гипохлорит ион, кислородные радикалы — супероксидный и гидроксильный) играют важную роль во многих жизненно важных процессах в организме. Влияние АМК проявляется в обновлении состава и обеспечении функциональных свойств биомембран, участии в энергетических процессах, клеточном делении, синтезе биологически активных веществ.

Перекись водорода (Hydrogenii peroxidum) - неорганическое химическое соединение, молекулярный вес 34, 01. Молекула перекиси водорода не представляет собой линейную последовательность атомов водорода и кислорода. Связи между атомами водорода и кислорода расположены под прямым углом к связи между атомами кислорода, причем в нескольких вариантах (рисунок 9). [13]

Связь O—O непрочна, поэтому H2O2 — неустойчивое соединение, легко разлагается. Пероксид водорода проявляет слабые кислотные свойства (К = 1,4·10−12), и поэтому диссоциирует по двум ступеням:

Рисунок 9 – Пространственное строение молекулы перекиси водорода

Пероксид водорода обладает окислительными, а также восстановительными свойствами. Пероксид водорода является более сильным окислителем, т. е. легко отдаёт свой лишний (по сравнению с более устойчивым соединением - водой) атом кислорода. Именно на окислительных свойствах основано его практическое применение. Характерный для пероксида водорода окислительный распад может быть схематически изображён так:

Н2О2 = Н2О + О (на окисление)

Кислая среда более благоприятствует этому распаду, чем щелочная. Значительно менее характерен для пероксида водорода восстановительный распад по схеме:

Н2О2 = О2 + 2 Н (на восстановление)

Щелочная среда более благоприятствует такому распаду, чем кислая.

1.2.1 Образование АФК в организме

В организме перекись водорода образуется в результате блокады конечного звена дыхательной цепи в митохондриях в условиях гипоксии, когда происходит разгрузка дыхательной цепи от постоянно пополняющих ее электронов за счет их утечки по пути следования к цитохромоксидазе. Причиной образования супероксидного анион-радикала и перекиси водорода в тканях при гипоксии является одноэлектронное восстановление O2 на убихиноне под влиянием электронов, не достигающих цитохромоксидазы.

Рисунок 10 – Образование АФК в организме

Кроме этого в процессе фагоцитоза супероксид-радикалы подвергаются действию супероксиддисмутазы, вследствие чего образуется перекись водорода. В норме фагоциты используют перекись водорода для синтеза гипохлорита под влиянием миелопероксидазы. Гипохлорит разрушает стенку бактериальной клетки и тем самым убивает бактерии. Перекись водорода диффундирует в клетки, но там разрушается в результате активности ферментов каталазы и глутатионпероксидазы . [24, 29]

В присутствии ионов двухвалентного железа перекись водорода разлагается с образованием гидроксильного радикала. Радикал гидроксила чрезвычайно активен химически и разрушает почти любую встретившуюся ему молекулу. Действуя на SH-группы, гистидиновые и другие аминокислотные остатки белков, он вызывает денатурацию последних и инактивирует ферменты. В нуклеиновых кислотах гидроксил радикал разрушает углеводные мостики между нуклеотидами и, таким образом, разрывает цепи ДНК и РНК, в результате чего происходят мутации и гибель клеток. Внедряясь в липидный слой клеточных мембран, радикал гидроксила запускает (инициирует) реакции цепного окисления липидов, что приводит к повреждению мембран, нарушению их функций и гибели клеток. [24, 31]

Перекись водорода образуется в реакциях с участием флавожелезопротеидов, медьсодержащих оксидаз, ферментов, содержащих молибден (ксантиндегидрогеназа, ксантиноксидаза, альдегидоксидаза). К дегидрогеназам, которые с помощью флавопротеидов переносят водород на молекулярный кислород с образованием H2O2, относятся моноамино-, диамино, глицин-, гликольоксидазы. Действие ферментов группы монооксигеназ (гидроксилаз), в частности флавопротеидных, включает последовательные стадии, в которых восстановитель переводит флавин в дигидроформу, восстанавливающую O2 до H2O2, затем фермент-флавин-пероксидный комплекс гидроксилирует субстрат. Образование H2O2 происходит при самопроизвольном окислении гемоглобина, ферредоксинов, восстановленных цитохромом b5 гидрохинонов, тетрагидроптеридинов, адреналина.

Ферменты, участвующие в метаболизме H2O2, в значительном количестве содержатся в таких клеточных органеллах, как пероксисомы.

В них H2O2 образует простые самоокисляющиеся флавопротеиды — ферменты уратоксидаза, оксидаза D-аминокислот, оксидаза a-оксикислот, а каталаза разрушает ее. Каталаза использует H2O2, образованную другими ферментами в пероксисоме, для окисления множества субстратов – например, фенолов, мурвьиной кислоты, формальдегида и спирта – с помощью окислительной реакции:

H2O2 + R.H2 --> R.+ 2H2O

1.2.2 Влияние АФК на мембраны

В настоящее время полагают, что перекись водорода в физиологических (микромолярных) концентрациях оказывает на клетки стимулирующее действие. Влияние перекиси проявляется в обновлении состава и обеспечении функциональных свойств биомембран, участии в энергетических процессах, клеточном делении, синтезе биологически активных веществ.

Свободные радикалы, в том числе и перекись водорода могут инициировать перекисное окисление полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК), играющее существенную роль во многих реакциях обмена, формировании структуры клетки и, в частности, мембран. Возникающие перекиси липидов лучше растворяются в воде, чем ПНЖК, из которых они образуются, и поэтому легче вымываются из мембран, способствуя самообновлению мембранных структур. Это создает благоприятные условия для функционирования ферментных систем в мембранах. Перекиси липидов необходимы для биосинтеза эйкозаноидов (простагландинов, простациклинов, тромбоксанов, лейкотриенов), прогестерона. Они участвуют в гидроксилировании холестерина (в частности, при образовании кортикостероидов). [33, 37,38]

Однако перекись водорода в избыточном количестве может оказывать негативное воздействие. Одной из важных мишеней повреждающего действия Н2О2 на микробную клетку является ее плазматическая мембрана. Происходит избыточная активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) (рисунок 11).

Рисунок 11 – Перекисное окисление липидов

Наиболее чувствительны к действию этих форм кислорода полиеновые жирные кислоты, которые в основном локализованы в фосфолипидах мембран. Легче всего свободные радикалы О2 отрывают электрон от СН2-группы, находящейся между двумя двойными связями. Образуются свободные радикалы жирной кислоты. Затем в результате развития цепной реакции образуются перекиси липидов. Конечным продуктом деградации жирных кислот при ПОЛ является малоновый диальдегид. Это химически очень активное вещество, которое своими альдегидными группами способно взаимодействовать с аминогруппами белков, вызывая их необратимую денатурацию.

Перекисное окисление липидов сопровождается окислением тиоловых (сульфгидрильных) групп мембранных белков. Это может приводить в результате к неферментативной реакции SH-групп со свободными радикалами липидов. При этом образуются сульфгидрильные радикалы, которые затем взаимодействуют с образованием дисульфидов либо окисляются кислородом с образованием производных сульфоновой кислоты.

Второй результат перекисного окисления липидов связан с тем, что продукты пероксидации обладают способностью непосредственно увеличивать ионную проницаемость липидного бислоя. Так, показано, что продукты перекисного окисления липидов делают липидную фазу мембран проницаемой для ионов водорода и кальция. Это приводит к потере митохондриями способности осуществлять синтез АТФ, и клетка оказывается в условиях энергетического голода. Одновременно в цитоплазму выходят ионы кальция, которые повреждают клеточные структуры.

Третий результат пероксидации - это уменьшение стабильности липидного слоя, что может привести к электрическому пробою мембраны собственным мембранным потенциалом, то есть под действием разности электрических потенциалов, существующей на мембранах живой клетки. Электрический пробой приводит к полной потере мембраной ее барьерных функций. [41]

1.2.3 Влияние АФК на белковые молекулы

Окислительной модификации также подвергаются белковые молекулы. Активные формы кислорода атакуют белки по всей длине полипептидной цепи, нарушая первичную, вторичную, третичную структуры. Это приводит к агрегации и фрагментации белковой молекулы. Наиболее распространенный тип повреждения белка – образование карбонильных групп при окислении аминокислот: лизина,аргинина и пролина. Карбоксильные группы белков под действием активных форм кислорода превращаются в карбонильные группы, которые могут взаимодействовать с аминогруппами и с углеводами, образуя Шиффовы основания, приводящие к образованию поперечных сшивок между белковыми молекулами (продукты Амадори) и нарушению их активности. [34]

Одно из проявлений сшивок между белками – потеря тканями эластичности. Это возникает при ковалентном "сетеобразовании", которое происходит при формировании поперечных ковалентных связей между коллагеновыми волокнами (рисунок 12). [52, 55]

Что касается фрагментации белков, то этот процесс инициируется гидроксильным радикалом преимущественно путем отрыва водорода у a-углеродного атома полипептидного остова молекулы с локализацией у этого атома свободной валентности. Причем, a-углеродный атом в составе полипептидной цепи (но не у свободных аминокислот) является одним из главных участков молекулы для атаки гидроксильным радикалом.

Скачать полную версию реферата [1,69 мб]   Информация о работе